Anlage 3 VO (EU) 2019/1390

SPEZIFISCHE PROTOKOLLPARAMETER DER EINZELNEN PRÜFMODELLE DIESER PRÜFMETHODE

Für die RhE-Modelle gelten sehr ähnliche Protokolle, und bei allen RhE-Modellen beträgt die Inkubationszeit nach der Behandlung 42 Stunden (32) (33) (34) (35). Die Variationen betreffen in erster Linie drei Parameter im Zusammenhang mit den verschiedenen Barrierefunktionen der Prüfmodelle: A) Vorinkubationszeit und Menge, B) Auftragung von Prüfchemikalien und C) Volumen nach der Inkubation.

RT:
Raumtemperatur
DW:
destilliertes Wasser
DPBS:
Dulbecco-Phosphatpuffer

A) Vor der InkubationB) Auftragung der PrüfchemikalieC) Volumen nach der InkubationD) Maximale Akzeptanzvariabilität
EpiSkinTM (SM)EpiDermTM SIT (EPI-200)SkinEthic RHETMLabCyte EPI-MODEL24 SIT
Inkubationszeit18-24 Stunden18-24 Stunden< 2 Stunden15-30 Stunden
Volumen des Mediums2 ml0,9 ml0,3 oder 1 ml0,5 ml
Für flüssige Stoffe10 μl (26 μl/cm2)30 μl oder 47 μl/cm2)16 μl oder 32 μl/cm2)25 μl oder 83 μl/cm2)
Für feste Stoffe10 mg (26 mg/cm2) + DW (5 μl)25 mg (39 mg/cm2) + DPBS (25 μl)16 mg (32 mg/cm2) + DW (10 μl)25 mg (83 mg/cm2) + DW (25 μl)
Verwendung eines Nylon-MaschenfiltersNicht verwendetWenn erforderlichAufgebrachtNicht verwendet
Gesamtdauer der Aufbringung15 Minuten60 Minuten42 Minuten15 Minuten
AufbringungstemperaturRaumtemperatur (RT)

a) 25 min bei RT

b) 35 min bei 37 oC

Raumtemperatur (RT)RT
Volumen des Mediums2 ml0,9 ml × 22 ml1 ml
Standardabweichung (SD) zwischen GewebereplikatenSD18SD18SD18SD18

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