BESTIMMUNG DES GEHALTS AN ÖNANTHSÄURE-TRIGLYCERID IN BUTTER, BUTTERSCHMALZ UND RAHM DURCH GASCHROMATOGRAFISCHE ANALYSE DER TRIGLYCERIDE

1.

ANWENDUNGSBEREICH

Im Folgenden wird eine Methode zur Bestimmung des Gehalts an Önanthsäure-Triglycerid in Butterschmalz, Butter und Rahm beschrieben.

2.

BEGRIFFSBESTIMMUNGEN

Önanthsäure-Gehalt: Der mit dem in dieser Methode beschriebenen Verfahren ermittelte Gehalt an Önanthsäure-Triglycerid.

Anmerkung: Der Önanthsäure-Gehalt wird bei Butterschmalz und Butter ausgedrückt in kg/t Produkt und bei Rahm in kg/t Milchfett.

3.

KURZBESCHREIBUNG

Milchfett wird aus den verschiedenen Produkten gemäß ISO 14156IDF 172:2001 extrahiert. Die quantitative Bestimmung des Gehalts an Önanthsäure-Triglycerid im gewonnenen Fett erfolgt durch Kapillarsäulen-Gaschromatografie. Das für die Probe ermittelte Ergebnis wird unter Annahme des Capronsäure-Triglycerids als interne Standardprobe bewertet.

Anmerkung: Auch Tributyrin hat sich als ausreichende interne Standardprobe erwiesen.

4.

REAGENZIEN

Es sind ausschließlich anerkannt analysenreine Reagenzien zu verwenden.

4.1. n-Hexan

4.2. Standard-Capronsäure-Triglycerid, Reinheit mindestens 99 %

4.3. Standard-Önanthsäure-Triglycerid, Reinheit mindestens 99 %

4.4. Wasserfreies Natriumsulfat (Na₂SO₄)

5.

APPARATUR

Normale Laborausrüstung sowie insbesondere:

5.1. eine Analysewaage, Genauigkeit 1 mg

5.2. Messkolben, Füllmengen 10 ml und 20 ml

5.3. Zentrifugenröhrchen, Füllmenge 30 ml

5.4. ein Rotationsverdampfer

5.5. ein Ofen, in dem eine gleich bleibende Temperatur von 50 °C ± 5 °C aufrechterhalten werden kann

5.6. Filterpapier, mittlere Porengröße, Durchmesser ca. 15 cm

5.7. Gaschromatografie-Ausrüstung:

5.7.1. ein Gaschromatograf mit Injektor (split/splitless oder on-column) und Flammenionisations-Detektor (FID);

5.7.2. eine GC-Säule, mit einer stationären Phase, in der erfolgreich eine Triglycerid-Abtrennung durchgeführt wurde (100 % Dimethylpolysiloxan oder 5 % Phenyl — 95 % Methylpolysiloxan). Die stationäre Phase, die Säulenhöhe (4 bis 15 m), der Innendurchmesser (0,22 bis 0,50 mm) und die Filmstärke (mindestens 0,12 μm) sind aufgrund von Erfahrungen im Laboratorium sowie abhängig vom jeweiligen Injektionssystem zu wählen. In jedem Fall müssen mit der gewählten Säule der Lösungsmittel-Peak und der Capronsäure-Triglycerid-Peak klar getrennt dargestellt und eine Basislinien-Auflösung zwischen dem Capronsäure-Triglycerid- und dem Önanthsäure-Triglycerid-Peak ermöglicht wird. Im Folgenden werden exemplarisch einige mögliche Aufbauten beschrieben.

5.7.2.1. Beispiele möglicher Aufbauten mit Split-Injektor:

—

Trägergas: Helium;

—

Kopfdruck Säule: 100 kPa;

—

Säule: 12 m Höhe, 0,5 mm Innendurchmesser, 0,1 μm Filmstärke Quarzglassäule;

—

stationäre Phase: 100 % Dimethylpolysiloxan oder 5 % Phenyl/95 % Dimethylpolysiloxan (z. B. HT5);

—

Säulentemperatur: Ausgangstemperatur 130 °C, Dauer 1 Minute, steigend um 20 °C/min bis auf 260 °C; anschließend weiterer Anstieg um 30 °C/min bis auf 360 °C; 10 min bei 360 °C;

—

Detektortemperatur: 370 °C;

—

Injektortemperatur: 350 °C;

—

Splitverhältnis: 1:30;

—

injiziertes Probenvolumen: 1 μl;

5.7.2.2. Beispiel eines möglichen Aufbaus mit On-Column-Injektor:

—

Trägergas: Wasserstoff (Constant-Flow-System);

—

Kopfdruck Säule: 89 kPa;

—

Säule: 4 m Höhe, 0,32 mm Innendurchmesser, 0,25 μm Filmstärke, Quarzglassäule;

—

stationäre Phase: 5 % Phenyl/95 % Dimethylpolysiloxan;

—

Säulentemperatur: Ausgangstemperatur 60 °C, Dauer 2 min, ansteigend um 35 °C/min auf 340 °C, Beibehaltung dieser Temperatur 5 min;

—

Detektortemperatur: 350 °C;

—

injiziertes Probenvolumen: 1 μl;

5.8. eine Injektionsspritze, Fassungsvermögen 5 μl.

6.

PROBENAHME

Wichtig ist, dass das Laboratorium eine Probe erhält, die tatsächlich repräsentativ ist und bei Transport oder Lagerung nicht beschädigt oder verändert wurde. Die Probenahme ist nicht Bestandteil der in dieser internationalen Norm spezifizierten Methode. Eine empfohlene Methode zur Probenahme ist IDF-Norm 50C: 1995 bzw. ISO 707-1997 — „Milch und Milchprodukte — Leitfaden zur Probenahme” zu entnehmen.

7.

VERFAHREN

7.1.

Herstellung der Testprobe und der Probeneinwaage

Verfahren gemäß ISO 14156IDF 172:2001

7.1.1.

Butterschmalz, Butter

7.1.1.1. 50 bis 100 g der Testprobe werden im Ofen (5.5) geschmolzen.

7.1.1.2. 0,5 bis 1,0 g wasserfreies Natriumsulfat (5.4) werden auf ein Faltenfilterpapier gegeben.

7.1.1.3. Das Fett wird durch das Filterpapier mit dem wasserfreien Natriumsulfat gefiltert, und das entstehende Filtrat in einem im Ofen (5.5) vorgehaltenen Becherglas aufgefangen. Beim Dekantieren der geschmolzenen Butter auf das Filterpapier ist darauf zu achten, dass kein Serum übertragen wird.

7.1.2.

Rahm

7.1.2.1. Die Testprobe wird auf 20 °C ±2 °C erwärmt.

7.1.2.2. Die Probe wird gründlich gemischt oder gerührt.

7.1.2.3. Von der Testprobe wird eine geeignete Menge aufgelöst, so dass sich eine Probeneinwaage von 100 ml mit einem Fettmasseanteil von etwa 4 % ergibt.

7.1.2.4. Anschließend ist das Fett wie bei Rohmilch und bei homogenisierter Milch (siehe ISO 14156IDF 172:2001, Absatz 8.3) aus dem Rahm abzutrennen.

7.1.2.5. In einen 10-ml-Messkolben (5.2) wird 1 g des gewonnenen Fetts gegeben (Toleranz 1 mg). 1 ml der in Absatz 7.2.2 genannten Lösung wird hinzugegeben. Anschließend ist der Messkolben unter Zugabe von n-Hexan (4.1) auf eine Füllmenge von 10 ml aufzufüllen und zu homogenisieren.

7.1.2.6. 1 ml der in Absatz 7.1.1.2 genannten Lösung wird in einen 10-ml-Messkolben (5.2) gegeben; anschließend wird mit n-Hexan (4.1) auf 10 ml aufgefüllt.

7.2.

Vorbereitung der Kalibrierungsstandards

7.2.1. 100 mg Önanthsäure-Triglycerid (4.3) werden in 10 ml n-Hexan (4.1) aufgelöst.

7.2.2. 100 mg Capronsäure-Triglycerid (4.2) werden in 10 ml n-Hexan (4.1) aufgelöst.

7.2.3. 1 ml der in Absatz 7.2.2 genannten Lösung wird in einen 10-ml-Messkolben (5.2) gegeben; anschließend wird mit n-Hexan (4.1) auf 10 ml aufgefüllt.

7.2.4. Jeweils 1 ml der in Absatz 7.2.1 und der in Absatz 7.2.2 genannten Lösung wird in einen 10-ml-Messkolben (5.2) gegeben; anschließend wird mit n-Hexan (4.1) auf 10 ml aufgefüllt.

7.2.5. 1 ml der in Absatz 7.2.4 genannten Lösung wird in einen 10-ml-Messkolben (5.2) gegeben; anschließend wird mit n-Hexan (4.1) auf 10 ml aufgefüllt.

7.3.

Chromatografische Bestimmung

7.3.1. Von der in Absatz 7.2.5 genannten Standardlösung wird zweimal 1 μl injiziert.

7.3.2. Von jeder Probenlösung ist jeweils 1 μl zu injizieren.

Anmerkung: Wenn der On-Column-Injektor eingesetzt wird, sollten sowohl die Standardlösung als auch die Probenlösungen in einer erhöhten Verdünnung verwendet werden.

7.3.3. Das in Absatz 7.3.1 genannte Verfahren ist bei jeder dritten Probe zu wiederholen, damit jeweils am Anfang und am Ende einer Probenreihe eine Standardinjektion erfolgen kann. Die Ergebnisse beruhen auf den mittleren durchschnittlichen Kalibrierfaktoren der Standardchromatogramme.

8.

BERECHNUNG DER ERGEBNISSE

Bei jedem Chromatogramm sind die Peak-Flächen des Önanthsäure- und des Capronsäure-Triglycerids zu integrieren. Diese Anweisungen sind für alle Probenfolgen zu wiederholen, bei denen jeweils vorher und nachher die Standardlösung injiziert wird. (Unmittelbar vor jeder Probenreihe wird zweimal die Standardlösung STD₁ injiziert, und unmittelbar nach jeder Probenreihe wird zweimal die Standardlösung STD₂ eingespritzt.)

8.1.

Kalibrierung

8.1.1. Jeweils für die zweite Probe von STD₁, Rf₁(a) und Rf₁(b) ist der Reaktionsfaktor zu berechnen. Rf₁ (a) oder (b) = (Peak-Fläche Capronsäure-Triglycerid/Peak-Fläche Önanthsäure-Triglycerid) × 100 Der mittlere durchschnittliche Reaktionsfaktor Rf₁ wird berechnet: Rf₁ = (Rf₁(a) + Rf₁(b)) / 2

8.1.2. Ähnlich wird der mittlere durchschnittliche Reaktionsfaktor für STD₂ und Rf₂ berechnet.

8.1.3. Der mittlere durchschnittliche Reaktionsfaktor Rf wird berechnet: Rf = (Rf₁ + Rf₂) /2

8.2.

Testproben

Für jedes ermittelte Proben-Chromatogramm zwischen STD₁ und STD₂ wird der Önanthsäuregehalt (C (in kg/t)) berechnet: C = (Peak-Fläche für Önanthsäure-Triglycerid × Rf × 100)/(Peak-Fläche Capronsäure-Triglycerid × Wt × 1000) Dabei sind:

—

Wt = Gewicht des gewonnenen Fetts (g),

—

100 = Verdünnungsvolumen der Probe,

—

1000 = Umrechnungsfaktor (μg/g in kg/t).

Bei Butterproben wird der Fettgehalt der Butter berücksichtigt und ein bereinigter Konzentrationswert C_Butter (kg/t Butter) berechnet C_Butter = C_Fett × F Dabei ist: F = Fettgehalt der Butter.

9.

GENAUIGKEIT

Nähere Informationen zu einem Leistungstest mit Butter gemäß ISO 5725-1 und ISO 5725-2 (Genauigkeit der Methode) sind Ziffer 12 zu entnehmen. Die Grenzwerte für die Wiederholbarkeit und die Vergleichbarkeit werden für das Konfidenzintervall 95 % ausgedrückt und sind auf andere als die genannten Konzentrationsbereiche und Matrizen möglicherweise nicht übertragbar.

9.1.

Wiederholbarkeit

Die absoluten Unterschiede zwischen zwei einzelnen Testergebnissen, die nach derselben Methode bei identischem Testmaterial im selben Laboratorium von demselben Analytiker und mit derselben Ausrüstung binnen eines kurzen Zeitraums ermittelt wurden, liegen in höchstens 5 % aller Fälle über 0,35 kg/t.

9.2.

Vergleichbarkeit

Die absoluten Unterschiede zwischen zwei einzelnen Testergebnissen, die nach derselben Methode bei identischem Testmaterial in verschiedenen Laboratorien von verschiedenen Analytikern und mit unterschiedlicher Ausrüstung ermittelt wurden, liegen in höchstens 5 % aller Fälle über 0,66 kg/t.

10.

TOLERANZGRENZEN: UNTERGRENZE (BEI UNZUREICHENDEN MENGEN)

10.1. Zur Prüfung der richtigen Kennzeichnung des Erzeugnisses sind dem gekennzeichneten Erzeugnis drei Proben zu entnehmen.

10.2.

Butter und Butterfett

10.2.1. Die Beimischungsquote beträgt 11 kg Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von 95 % pro Tonne Butter (d. h. 10,45 kg/t).

10.2.2. Die Ergebnisse von drei Proben, die aus der Analyse des Produkts ermittelt wurden, werden zur Prüfung der Quote und der Homogenität der Beimischung des Kennzeichnungsmittels verwendet; das niedrigste dieser Ergebnisse wird bezogen auf die folgenden Grenzwerte beurteilt:

—

9,51 kg/t (95 % der Mindestquote der Beimischung von Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von 95 %, einfache Bestimmung);

—

6,89 kg/t (70 % der Mindestquote der Beimischung von Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von 95 %, einfache Bestimmung);

—

es wird die Kennzeichnungsmittelkonzentration der Probe mit dem niedrigsten Ergebnis verwendet, das man durch Interpolierung zwischen 9,51 kg und 6,89 kg erhält.

10.3.

Rahm

10.3.1. Die Beimischung beträgt 10 kg Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von mindestens 95 % pro Tonne Milchfett (d. h. 9,50 kg/t gekennzeichnetes Milchfett).

10.3.2. Aufgrund der Ergebnisse der drei in der Produktanalyse untersuchten Proben wird die Homogenität der Beimischung des Kennzeichnungsmittels geprüft; das niedrigste Ergebnis wird bezogen auf die folgenden Grenzwerte beurteilt:

—

8,60 kg/t (95 % der Mindestquote der Beimischung von Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von 95 %, einfache Bestimmung);

—

6,23 kg/t (70 % der Mindestquote der Beimischung von Önanthsäure-Triglycerid mit einer Reinheit von 95 %, einfache Bestimmung);

—

es wird die Kennzeichnungsmittelkonzentration der Probe mit dem niedrigsten Ergebnis verwendet, das man durch Interpolierung zwischen 8,60 kg und 6,23 kg erhält.

11.

TOLERANZGRENZEN: OBERGRENZEN (BEI ÜBERSCHREITUNG DER MENGE UM MEHR ALS 20 %)

11.1. Zur Prüfung der richtigen Kennzeichnung des Erzeugnisses sind dem gekennzeichneten Erzeugnis drei Proben zu entnehmen.

11.2.

Butter und Butterfett

11.2.1. Die Ergebnisse von drei Proben, die aus der Analyse des Produkts ermittelt wurden, werden zur Prüfung der Quote und der Homogenität der Beimischung des Kennzeichnungsmittels verwendet; das niedrigste dieser Ergebnisse wird bezogen auf den folgenden Grenzwert beurteilt:

—

oberer Grenzwert 12,96 kg/t.

11.3.

Rahm

11.3.1. Die Ergebnisse von drei Proben, die aus der Analyse des Produkts ermittelt wurden, werden zur Prüfung der Quote und der Homogenität der Beimischung des Kennzeichnungsmittels verwendet; das niedrigste dieser Ergebnisse wird bezogen auf den folgenden Grenzwert beurteilt:

—

oberer Grenzwert 11,82 kg/t.

12.

WEITERE INFORMATIONEN: STATISTISCHE ANALYSE VON ERGEBNISSEN BEI DER BESTIMMUNG VON ÖNANTHSÄURETRIGLYCERID IN BUTTERFETT DURCH TRIGLYCERIDANALYSE

Zur Bestimmung des Önanthsäuretriglycerid-Gehalts in gekennzeichneter Butter wurden vier gemeinsame Versuche durchgeführt. Am ersten Ringtest haben sich neun Laboratorien beteiligt; es wurden keine Spezifikationen bezüglich der anzuwendenden Analysemethoden vorgegeben. Am zweiten Ringtest nahmen zehn Laboratorien teil; es wurden vier unterschiedliche Methoden angewendet:

—

quantitative Methylheptanoat-Bestimmung mit n-Nonan oder Methylnonanoat als interner Standardprobe;

—

quantitative Önanthsäuretriglycerid-Bestimmung mit Tricaproat als interner Standardprobe;

—

quantitative Methylheptanoat-Bestimmung mit einer Kalibrierungsprobe/Gemisch;

—

quantitative Methylheptanoat-Bestimmung mit einem Kalibrierungsgemisch.

Wenn FAME analysiert würde, müssten zudem zwei verschiedene Verfahren zum Methylierungsnachweis (De Francesco und Christopherson & Glass) eingesetzt werden. Wegen der ermittelten Ergebnisse wurden zwei Methoden zur Durchführung des dritten Ringtests gewählt:

—

quantitative Methylheptanoat-Bestimmung mit n-Nonan oder Methylnonanoat als interner Standardprobe;

—

quantitative Önanthsäuretriglycerid-Bestimmung mit Tricaproat als interner Standardprobe.

Die Ergebnisse von sieben Laboratorien zeigten, dass sich mit der FAME-Methode eine höhere Variabilität ergab, und entsprechend wurde entschieden, ausschließlich die Bestimmung mit Önanthsäuretriglycerid als Triglycerid gemäß dem Verfahren zum quantitativen Önanthsäuretriglycerid-Nachweis mit Tricaproat als interner Standardprobe zu verwenden. Zudem muss die Triglyceridanalyse mit einer Kapillarsäule durchgeführt werden. Im vierten Ringtest wurden vier Proben (A, B, C und D) verteilt, und neun Laboratorien übermittelten Ergebnisse (Tabellen 1-2). Zwei Laboratorien (DE und EU) analysierten die Proben nach der FAME-Methode. Wegen der geringeren Anzahl der Laboratorien wurde die statistische Berechnung sowohl für die gesamte Datengruppe (Abbildungen 1-2) einschließlich der FAME-Ergebnisse als auch für die aus der TG-Analyse ermittelten Daten durchgeführt.

Tests auf Ausreißer

—

Probe A: In Dixon-, Cochran- und Grubbs-Tests mit 1 und 5 % wurde ein Ausreißer in einem Laboratorium festgestellt.

—

Probe B: Im Grubbs-Test mit 5 % wurde ein Ausreißer in einem Laboratorium festgestellt.

—

Probe C: In Dixon- und Grubbs-Tests mit 1 und 5 % wurde in einem Labor ein Ausreißer festgestellt.

—

Probe D: In Dixon- und Grubbs-Tests mit 1 und 5 % wurde in einem Laboratorium ein Ausreißer festgestellt.

Der Ausreißer wurde bei der Berechnung nicht berücksichtigt. Die mit der FAME-Methode ermittelten Ergebnisse wurden mit den durchgeführten Tests nie als Ausreißer gewertet.

Parameter für die Genauigkeit

In den Tabellen 1 und 2 sind die Ergebnisse aller Laboratorien und die Parameter für die Genauigkeit genannt, die für eine annehmbare Anzahl (8) an Laboratorien berechnet wurden; die Ergebnisse beruhen leider aber nicht alle auf derselben Analysemethode. In den Tabellen 3 und 4 sind ausschließlich mit der TG-Methode ermittelte Ergebnisse sowie die entsprechenden Genauigkeitsparameter zusammengestellt. Die Annahme dieser Parameter unterliegt dem Vorbehalt der Annahme der geringen Anzahl an Laboratorien (6). Aus den Abbildungen 2 und 3 gehen die Trends der berechneten Werte für Sr und SR der vier Proben der beiden beschriebenen Datenreihen hervor. In Tabelle 5 sind die Werte für Sr und SR mit den entsprechenden Pool-Werten und den Gesamtparametern r und R zusammengestellt. Außerdem wurde die kritische Differenz bei einem Konfidenzintervall von 95 % berechnet.

Tabelle 1

Statistische Ergebnisse TG- und FAME*-Methode

Probe A		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausscheiden von Ausreißern	8
RENNES	FR1	11,0	11,1	11,1	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	11,2	11,2	11,2	Ausreißer	DК
ZPLA	DE*	11,6	11,8	11,7	Mittelwert	11,3
ADAS	GB	11,4	11,2	11,3	Tatsächlicher Wert	11,0
CNEVA	FR2	11,4	11,4	11,4	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,09
LODI	IT	11,1	11,3	11,2	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	0,80
ËÈLA	FI	11,3	11,2	11,3	Wiederholbarkeit < r (95 %)	0,26
ISPRA	EU*	11,0	11,0	11,0	Relative Wiederholbarkeit r %	2,24
D.V.F.A.	DK	13,3	11,8	12,6	Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,23
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	2,04
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,84
					Relative Vergleichbarkeit R %	5,71
Probe B		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	8
RENNES	FR1	12,7	12,8	12,8	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	13,5	13,3	13,4	Ausreißer	DK
ZPLA	DE*	14,0	13,8	13,9	Mittelwert	13,4
ADAS	GB	13,4	13,5	13,5	Tatsächlicher Wert	13,5
CNEVA	FR2	13,3	13,4	13,4	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,14
LODI	IT	13,9	13,5	13,7	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	1,04
EELA	FI	13,4	13,2	13,3	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,40
ISPRA	EU*	13,2	13,3	13,3	Relative Wiederholbarkeit r %	2,91
D.V.F.A.	DK	14,1	14,8	14,5	Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,35
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	2,61
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,99
					Relative Vergleichbarkeit R %	7,31

Tabelle 2

Statistische Ergebnisse TG- und FAME*-Methode

Probe C		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	8
RENNES	FR1	8,9	9,2	9,1	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	9,2	9,3	9,3	Ausreißer	DK
ZPLA	DE*	9,2	9,4	9,3	Mittelwert	9,3
ADAS	GB	9,5	9,3	9,4	Tatsächlicher Wert	9,3
CNEVA	FR2	9,4	9,4	9,4	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,14
LODI	IT	9,2	9,5	9,4	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	1,50
EELA	FI	9,4	9,6	9,5	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,40
ISPRA	EU*	9,4	9,3	9,4	Relative Wiederholbarkeit r %	4,20
D.V.F.A.	DK	10,7	10,9	10,8	Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,17
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	1,82
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,47
					Relative Vergleichbarkeit R %	5,10
Probe D		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	8
RENNES	R1	1,6	1,6	1,6	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	2,1	2,1	2,1	Ausreißer	DK
ZPLA	DE*	2,3	2,3	2,3	Mittelwert	2,1
ADAS	GB	2,1	2,2	2,2	Tatsächlicher Wert	2,1
CNEVA	FR2	2,1	2,1	2,1	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,08
LODI	IT	2,2	1,9	2,1	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	3,81
EELA	FI	2,3	2,3	2,3	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,22
ISPRA	EU*	2,3	2,3	2,3	Relative Wiederholbarkeit r %	10,67
D.V.F.A.	DK	3,4	2,9	3,2	Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,24
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	11,43
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,67
					Relative Vergleichbarkeit R %	32,00

Tabelle 3

Statistische Ergebnisse TG- und FAME*-Methode

Probe A		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	6
RENNES	FR1	11,0	11,1	11,1	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	11,2	11,2	11,2	Ausreißer	DК
ADAS	GB	11,4	11,2	11,3	Mittelwert	11,2
CNEVA	FR2	11,4	11,4	11,4	Tatsächlicher Wert	11,0
LODI	IT	11,1	11,3	11,2	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,09
ËÈLA	FI	11,3	11,2	11,3	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	0,80
D.V.F.A.	DK	13,3	11,8	12,6	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,25
					Relative Wiederholbarkeit r %	2,24
					Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,13
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	1,16
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,36
					Relative Vergleichbarkeit R %	3,25
Probe B		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	6
RENNES	FR1	12,7	12,8	12,8	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	13,5	13,3	13,4	Ausreißer	DК
ADAS	GB	13,4	13,5	13,5	Mittelwert	13,3
CNEVA	FR2	13,3	13,4	13,4	Tatsächlicher Wert	13,5
LODI	IT	13,9	13,5	13,7	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,15
EELA	FI	13,4	13,2	13,3	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	1,13
D.V.F.A.	DK	14,1	14,8	14,5	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,42
					Relative Wiederholbarkeit r %	3,16
					Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,33
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	2,48
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,93
					Relative Vergleichbarkeit R %	6,94

Tabelle 4

Statistische Ergebnisse TG-Methode

Probe C		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Anzahl Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	6
RENNES	FR1	8,9	9,2	9,1	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	9,2	9,3	9,3	Ausreißer	DК
ADAS	GB	9,5	9,3	9,4	Mittelwert	9,3
CNEVA	FR2	9,4	9,4	9,4	Tatsächlicher Wert	9,3
LODI	IT	9,2	9,5	9,4	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,15
ËÈLA	FI	9,4	9,6	9,5	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	1,61
D.V.F.A.	DK	10,7	10,9	10,8	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,42
					Relative Wiederholbarkeit r %	4,51
					Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,19
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	2,04
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,53
					Relative Vergleichbarkeit R %	5,71
Probe D		R1	R2	Mittelwert	Verbleibende Anzahl Laboratorien nach Ausschluss von Ausreißern	6
RENNES	FR1	1,6	1,6	1,6	Anz. Ausreißer	1
RIKILT	NL	2,1	2,1	2,1	Ausreißer Mittelwert	DK
					Mittelwert	2,1
ADAS	GB	2,1	2,2	2,2	Tatsächlicher Wert	2,1
CNEVA	FR2	2,1	2,1	2,1	Wiederholstandardabweichung (Sr)	0,09
LODI	IT	2,2	1,9	2,1	Relative Wiederholbarkeit sd (RSDr %)	4,29
EELA	FI	2,3	2,3	2,3	Wiederholbarkeit r (95 %)	0,26
D.V.F.A.	DK	3,4	2,9	3,2	Relative Wiederholbarkeit r%	12,01
					Vergleichsstandardabweichung (SR)	0,25
					Relative Vergleichbarkeit sd (RSDR %)	11,90
					Vergleichbarkeit R (95 %)	0,69
					Relative Vergleichbarkeit R %	33,32

Tabelle 5

Wiederholbarkeit und Vergleichbarkeit (mit FAME)

CrD95 = 0,40

Erklärte Mindestreinheit für Önanthsäuretriglycerid = 95 %

Erklärter unterer Grenzwert für Önanthsäuretriglycerid in Butterfett = 11 kg/t

In Anbetracht der kritischen Differenz bei einem Konfidenzintervall von 95 % darf der Mittelwert dieser beiden Ergebnisse folgende Werte nicht unterschreiten:

bei Beimischung von Önanthsäuretriglycerid mit einer Reinheit von 95 % 10,05 kg/t.

	Anz. Laboratorien	Ausreißer	Wiederholbarkeit Sr (95 %)	Vergleichbarkeit SR (95 %)
Probe A	8	1	0,09	0,23
Probe Β	8	1	0,14	0,35
Probe C	8	1	0,14	0,17
Probe D	8	1	0,08	0,24
Pool-Wert			0,116	0,256
			r	R
Pool-Wert * 2,8			0,324	0,716

Wiederholbarkeit und Vergleichbarkeit (ohne FAME)

CrD95 = 0,36

Erklärte Mindestreinheit für Önanthsäuretriglycerid = 95 %

Erklärter unterer Grenzwert für Önanthsäuretriglycerid in Butterfett = 11 kg/t

In Anbetracht der kritischen Differenz bei einem Konfidenzintervall von 95 % darf der Mittelwert dieser beiden Ergebnisse folgende Werte nicht unterschreiten:

bei Beimischung von Önanthsäuretriglycerid mit einer Reinheit von 95 % 10,09 kg/t.

	Anz. Laboratorien	Ausreißer	Wiederholbarkeit Sr (95 %)	Vergleichbarkeit SR (95 %)
Probe A	6	1	0,09	0,13
Probe B	6	1	0,15	0,33
Probe C	6	1	0,15	0,19
Probe D	6	1	0,09	0,25
Pool-Wert			0,124	0,237
			r	R
Pool-Wert * 2,8			0,347	0,663

Abbildung 1^(*)

Versuchsergebnisse Probe A

Versuchsergebnisse Probe B

Versuchsergebnisse Probe C

Versuchsergebnisse Probe D

Abbildung 2

Abbildung 3

Abbildung 4